样品过滤故障排除
在大多数情况下,我们制备样品的原因是导致我们在过滤过程中遇到的问题。本文介绍了一些提示和技巧,这些技巧和窍门将帮助您解决过滤样本中由于使用PVDF注射器过滤器和其他任何可能使用的过滤器而可能忽略的问题。
在为您的工作准备样品时,样品过滤无处不在,因为它旨在消除进样前的颗粒。我们大多数人都会忽略这一事实。过滤器主体是使用各种材料构造而成的,与应用程序一起使用的溶剂将决定您选择使用哪种。
化学相容性
您的供应商将帮助您选择与您的应用化学兼容的过滤器材料,因为只有少数子集材料。例如,当使用有机溶剂或其他具有极端pH值的溶剂时,应确保不会发生滤膜崩解。
允许任何渗滤液是色谱图内干扰的原因,特别是在使用光谱检测器时,干扰会影响分析的质量和数量。如果您怀疑是否存在沥出液,则需要使用1毫升等分试样冲洗,这对于大多数过滤器来说通常就足够了-可以对其进行预清洗。
分析物结合
分析物的结合/吸附是您可能会遇到的另一个问题。它能够对程序的定量执行产生影响。吸附度随过滤器类型而变化,样品基质将决定变化。
玻璃纤维和尼龙显示出与肽和蛋白质的高度结合,而聚醚砜(PES)和聚偏二氟乙烯(PVDF)氟化物通常是理想的。诸如聚四氟乙烯(PTFE)和PVDF的亲水膜往往对重量更轻的分子分析物产生zui小的非特异性结合。因此,在开发方法时,应始终对这些过滤器的绑定进行一些调查。通过尝试使用未过滤和过滤后的样品,您的仪器对每种分析物有何反应,就可以做到这一点。
预滤器
有些分析物充满了颗粒。在这种情况下,容易进行的处理将需要预过滤器,以使其下方的多孔膜连续流动。这样的注射器被称为多层注射器,其具有允许样品多通过五次的能力。请注意,大量的预过滤器实际上是玻璃纤维,这将使蛋白质过滤成为不可能。因此,您应该选择使用PES或PVDF预过滤器构造材料的过滤器。
选择适合您的应用的过滤器尺寸也至关重要。大直径的过滤器将使样品快速流动,而无需太大的压力且堵塞更少。但是,要为更高的可提取水平,较大的滞留体积以及更高的非特异性分析物结合可能性做好准备。选择PVDF针头过滤器或任何其他具有适当孔隙率和合适的过滤器孔径(用于UHPLC分析的孔径为2um)的过滤器至关重要。
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